產品名稱：人乳腺癌細胞（三陰性）BT20

人乳腺癌細胞（三陰性）BT20收到后處理

細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的培養液收集至離心管中，加入6ml培養基，放入37℃、5%CO2孵箱培養；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養步驟。（注意發貨的是密封培養瓶的話，放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的培養基，另外一瓶用自己配的培養基）

人乳腺癌細胞（三陰性）BT20培養步驟

一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的培養基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數換液方式，棄半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿，加入5ml左右培養基混勻，放入培養箱過夜培養后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續培養，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。

三、細胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司貨號：C7001）

1、細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；

2、添加0.25%消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；

4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃

人乳腺癌細胞（三陰性）BT20部分相關細胞如下：

YS1514NCIH1781人細支氣管肺泡癌細胞NCIH1781

YS1515NCIH1581人非小細胞肺癌細胞NCIH1581

YS1516HBEC5i人大腦內皮細胞HBEC5i

YS1517HuNS1人多發性骨髓瘤細胞HuNS1

YS1518RL人B細胞非霍奇金淋巴瘤細胞RL

YS1519MD人脾細胞MD

YS1520RC人B淋巴瘤細胞RC

YS1521SW684人纖維肉瘤細胞SW684

YS1522PhoenixECO人逆轉錄病毒包裝細胞系PhoenixECO

YS1523BICR3人舌鱗狀細胞癌BICR3

YS1524OE19人食管癌細胞OE19

YS1525SNU601人印戒細胞胃腺癌SNU601

YS1526SNU1066人喉鱗狀細胞癌SNU1066

YS1527SNU46人喉鱗狀細胞癌SNU46

YS1528MNT1人黑色素瘤細胞MNT1

YS1529HARSpondin1FcHEK293Tcells人穩定表達RspoI蛋白的293T細胞HARSpondin1FcHEK293Tcells

YS1530MUGChor1人骶骨脊索瘤細胞MUGChor1

YS1531SNU899人喉鱗狀細胞癌SNU899

YS1532SNU1076人喉鱗狀細胞癌SNU1076

YS1533TK6人成淋巴細胞/遺傳性球形紅細胞增多癥TK6

YS1534LUDLU1人肺鱗狀細胞癌細胞LUDLU1

YS1535UMChor5人顱底脊索瘤細胞UMChor5

YS1536MP46人眼葡萄膜黑色瘤細胞MP46

YS1537NCIH187人小細胞肺癌細胞NCIH187

YS1538MOLT3人急性T淋巴細胞白血病細胞MOLT3

YS1539LL97A(AlMy)人肺成纖維細胞-原發性肺纖維化LL97A(AlMy)

YS1540SW962人外陰癌細胞SW962

YS1541SW872人脂肪肉瘤細胞SW872

YS1542NALM1人慢性粒細胞白血病細胞NALM1

YS1543NCIH2030人肺腺癌細胞NCIH2030

YS1544Loucy人急性T淋巴細胞白血病Loucy

YS1545NTERA2人惡性多發性畸胎瘤細胞NTERA2

YS1546HCC1395人乳腺癌細胞（三陰性）HCC1395

YS1547SKNO1人急性髓系白血病細胞SKNO1

YS1548NTERA2clD1人睪丸癌細胞NTERA2cl.D1

YS1549Huh1人肝癌細胞Huh1

YS1550HCC1806人乳腺鱗狀癌細胞（三陰性）HCC1806

YS1551OCILy7人彌漫大B淋巴瘤細胞OCILy7

YS1552HCC1954人乳腺導管癌細胞TNMIIA期，3級/products/crl-2338HCC1954

YS1553BT20人乳腺癌細胞（三陰性）BT20

YS1554LAPC4人前列腺癌細胞LAPC4

YS1555OPM2人多發性骨髓瘤細胞OPM2

YS1556SUDHL8人B細胞淋巴瘤SUDHL8

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